骨骼肌細(xì)胞因其纖維化結(jié)構(gòu)緊密、細(xì)胞間連接復(fù)雜，傳統(tǒng)手工制備方法不僅耗時(shí)費(fèi)力，更易因機(jī)械剪切力失控導(dǎo)致細(xì)胞活率驟降（活率常低于60%），嚴(yán)重制約了科研研究的實(shí)驗(yàn)效率和數(shù)據(jù)的可靠性。為更好地制備骨骼肌細(xì)胞懸液，今天我們就選用一款實(shí)驗(yàn)室人人推薦的凈信JX-DLDXB系列單細(xì)胞懸液制備儀，來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>借助單細(xì)胞懸液制備儀與配套試劑，將小鼠骨骼肌組織快速解離為形態(tài)完整、活率高的單細(xì)胞懸液，滿(mǎn)足單細(xì)胞測(cè)序、細(xì)胞培養(yǎng)、流式分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。

　　實(shí)驗(yàn)材料與儀器清單：

　　1.實(shí)驗(yàn)材料：小鼠骨骼肌組織、骨骼肌組織單細(xì)胞解離酶(貨號(hào)：MJ010)、紅細(xì)胞裂解液(貨號(hào)：MJ103)、預(yù)冷PBS緩沖液、臺(tái)盤(pán)藍(lán)染色液。

　　2.儀器清單：無(wú)菌手術(shù)器械套裝(眼科剪、鑷子)、單細(xì)胞懸液制備儀、高速冷凍離心機(jī)、倒置顯微鏡、無(wú)菌EP管、精準(zhǔn)移液系統(tǒng)。

　　單細(xì)胞制備儀對(duì)小鼠骨骼肌組織懸液制備的實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1.試劑預(yù)處理：需要先將骨骼肌組織單細(xì)胞解離酶置于冰上解凍，全程保持冰浴狀態(tài)備用，避免酶活性流失。

　　2.小鼠處理與組織取材：采用斷頸法處死小鼠后，迅速分離出骨骼肌組織，用預(yù)冷PBS緩沖液反復(fù)沖洗，去除表面血液、筋膜等雜質(zhì)。稱(chēng)取約130mg潔凈的骨骼肌組織，剪碎、放入單細(xì)胞制備儀的研磨管中，加入所需酶。

　　3.儀器消化：采用斷頸法處死小鼠后，迅速分離出骨骼肌組織，用預(yù)冷PBS緩沖液反復(fù)沖洗，去除表面血液、筋膜等雜質(zhì)。稱(chēng)取約130mg潔凈的骨骼肌組織，剪碎、放入單細(xì)胞制備儀的研磨管中，加入所需酶。

　　4.紅細(xì)胞裂解與清洗：用3-5倍體積的紅細(xì)胞裂解液重懸細(xì)胞沉淀，冰上孵育10分鐘，期間用移液系統(tǒng)輕柔吹打2-3次。隨后再次以 4℃、300g離心5分鐘，棄上清后用預(yù)冷PBS緩沖液清洗重懸2次，去除殘留裂解液。

　　5.細(xì)胞重懸與鏡檢質(zhì)控：用適量PBS緩沖液重懸細(xì)胞沉淀，取少量細(xì)胞懸液與臺(tái)盤(pán)藍(lán)染色液按比例混合，滴加至細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，通過(guò)倒置顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)并計(jì)算活率。

　　單細(xì)胞制備儀對(duì)小鼠骨骼肌組織懸液制備的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與優(yōu)勢(shì)：

　　1.核心結(jié)果：

　?、侔螒B(tài)：經(jīng)儀器制備的細(xì)胞透亮圓潤(rùn)，形態(tài)完整，無(wú)明顯細(xì)胞碎片和組織殘?jiān)?/p>

　?、诩?xì)胞活率：臺(tái)盤(pán)藍(lán)染色檢測(cè)顯示，活細(xì)胞率穩(wěn)定≥95%，滿(mǎn)足高要求實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

　?、奂?xì)胞數(shù)量：離心后可見(jiàn)明顯細(xì)胞沉淀，重懸后的單細(xì)胞懸液均勻分散，無(wú)團(tuán)聚現(xiàn)象。

　　2.儀器制備化優(yōu)勢(shì)：

　?、傩侍嵘航M織破碎、酶解消化等步驟通過(guò)儀器標(biāo)準(zhǔn)化完成，全程耗時(shí)縮短 30% 以上。

　　②穩(wěn)定性強(qiáng)：避免手動(dòng)操作的力度、速度差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)性高。

　?、蹞p傷更小：儀器研磨和振蕩溫和，減少細(xì)胞機(jī)械損傷，顯著提升細(xì)胞活率。

　　上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀可在15-30分鐘內(nèi)完成骨骼肌細(xì)胞懸液的制備，不僅顯著縮短了實(shí)驗(yàn)處理時(shí)間，同時(shí)更是將細(xì)胞活率提升至95%以上，為其提供“快、準(zhǔn)、穩(wěn)”的標(biāo)準(zhǔn)化解決方案。讓小鼠骨骼肌單細(xì)胞懸液的制備更高效、更穩(wěn)定，實(shí)現(xiàn)效率與活率雙突破，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供可靠的樣本保障。